RNA提取的原理與方法
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細(xì)胞中的 RNA 可以分為信使RNA、轉(zhuǎn)運(yùn)RNA 和核糖體RNA 三大類,不同組織總RNA 提取的實(shí)質(zhì)就是將細(xì)胞裂解,釋放出RNA,并通過不同方式去除蛋白,DNA 等雜質(zhì),終獲得高純度RNA 產(chǎn)物的過程。 提取得到 RNA 溶液后,我們需要對(duì) RNA 進(jìn)行相關(guān)的質(zhì)量檢測,以確定它是否符合后續(xù)實(shí)驗(yàn)的要求。RNA 用于不同的后續(xù)實(shí)驗(yàn),對(duì)其質(zhì)量要求不盡相同。cDNA 文庫構(gòu)建要求 RNA 完整且無酶等抑制物殘留;Northern blot 實(shí)驗(yàn)對(duì) RNA 完整性要求較高,對(duì)酶反應(yīng)抑制物殘留要求較低;RT-PCR 實(shí)驗(yàn)對(duì)RNA 完整性要求不太高,但對(duì)酶反應(yīng)抑制物殘留要求嚴(yán)格。因此在進(jìn)行不同的實(shí)驗(yàn)時(shí)應(yīng)選擇不同的方法純化RNA,以達(dá)到j(luò)ia的實(shí)驗(yàn)效果。 |
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